Bioloģiskajos pētījumos parasti izmanto polipeptīdus ar garu secību.Peptīdiem, kuru secībā ir vairāk nekā 60 aminoskābes, to iegūšanai parasti izmanto gēnu ekspresiju un SDS-PAGE.Tomēr šī metode aizņem ilgu laiku, un gala produkta atdalīšanas efekts nav labs.
Izaicinājumi un risinājumi ilgstošai peptīdu sintēzei
Garo peptīdu sintēzē mēs vienmēr saskaramies ar problēmu, tas ir, kondensācijas reakcijas steriskais kavēklis palielinās, palielinoties secībai sintēzē, un reakcijas laiks ir jāpielāgo, lai reakcija būtu pabeigta.Tomēr, jo ilgāks reakcijas laiks, jo vairāk rodas blakusparādību, un veidojas mērķa peptīda daļa.Šādi atlikumi – deficītas peptīdu ķēdes ir galvenie piemaisījumi, kas rodas ilgstošas peptīdu sintēzes laikā.Tāpēc garo peptīdu sintēzē galvenā problēma, kas mums jāpārvar, ir izpētīt augstas kvalitātes reakcijas apstākļus un reakcijas metodes, lai padarītu aminoskābju kondensācijas reakciju visaptverošāku un pilnīgāku.Turklāt samaziniet reakcijas laiku, jo jo ilgāks reakcijas laiks, jo vairāk nekontrolējamu blakusreakciju, jo sarežģītāki blakusprodukti.Tāpēc ir apkopoti šādi trīs punkti:
Mikroviļņu sintēzi var izmantot: Dažām sintēzes procesā sastopamajām aminoskābēm, kuras nav viegli integrēt, var izmantot mikroviļņu sintēzi.Šai metodei ir ievērojami rezultāti, tā ievērojami samazina reakcijas laiku un samazina divu galveno blakusproduktu veidošanos.
Var izmantot fragmentu sintēzes metodi: Ja dažus peptīdus ir grūti sintezēt ar parastajām sintēzes metodēm un tos nav viegli attīrīt, mēs varam pieņemt visu vairāku aminoskābju kondensāciju noteiktā peptīda segmentā uz peptīdu ķēdi kopumā.Šī metode var arī atrisināt daudzas sintēzes problēmas.
Var izmantot acilhidrazīda sintēzi: peptīdu sintēze ar acilhidrazīdu ir N-gala Cys peptīda un C-gala polipeptīda hidrazīda cietās fāzes sintēzes metode ķīmiski selektīvai reakcijai starp amīda saišu veidošanos, lai panāktu peptīdu saistīšanas metodi.Pamatojoties uz Cys pozīciju peptīdu ķēdē, šī metode sadala visu peptīdu ķēdi vairākās sekvencēs un attiecīgi sintezē tās.Visbeidzot, mērķa peptīds tiek iegūts šķidruma fāzes kondensācijas reakcijā.Šī metode ne tikai ievērojami samazina garā peptīda sintēzes laiku, bet arī ievērojami palielina galaprodukta tīrību.
Ilgstoša peptīdu attīrīšana
Garo peptīdu īpatnība neizbēgami noved pie sarežģītiem neapstrādātu peptīdu komponentiem.Tāpēc arī garo peptīdu attīrīšana ar HPLC ir izaicinājums.amiloīda sērijas polipeptīdu attīrīšanas process, kas absorbē lielu pieredzi un veiksmīgi izmanto garo peptīdu attīrīšanā.Ieviešot jaunu aprīkojumu, sajaucot vairākas attīrīšanas sistēmas, atkārtoti atdalot un izmantojot citas pieredzes metodes, tika ievērojami uzlabots ilgstošas peptīdu attīrīšanas panākumu līmenis.
Publicēšanas laiks: 18.04.2023